Изучение эффективности фотодинамической терапии воспалительных заболеваний пародонта с препаратом «РадаДент плюс»

И.А. Шугайлов, А.Р. Джанчатова Российская медицинская академия последипломного образования, Москва, Н.Н. Булгакова, Институт общей физики имени А.М . Прохорова РАН, Москва

ВВЕДЕНИЕ

Несмотря на значительный прогресс в решении   проблемы противовоспалительной терапии заболеваний полости рта, достигнутый в последние десятилетия, остается актуальной разработка  новых  методов лечения. Одной  из  причин является наблюдаемое в последние годы  резкое увеличение резистентности многих штаммов микроорганизмов к  антибиотикам и  антисептикам,  а также  дисбактериоза при их применении.
В этой связи особый интерес представляет метод фотодинамической терапии (ФДТ),  который широко  применяется как  для  лечения онкологических, так и неонкологических заболеваний,  в том числе, в стоматологии. Основу  ФДТ составляет способность  некоторых химических препаратов, называемых фотосенсибилизаторами (ФС), в присутствии кислорода сенсибилизировать  биологические системы к воздействию светового излучения определенной  длины  волны.
Несмотря на то, что исследования в области ФДТ в России ведутся уже более 15 лет,  применение этого метода  для  лечения заболеваний пародонта сдерживалось до  настоящего времени  отсутствием достаточно эффективных, нетоксичных и доступных для широкого применения ФС, а также  медицинской  технологии их использования в стоматологической практике.

В настоящее время в России разрешение на клиническое применение при ФДТ в стоматологии  имеет только   один  препарат –  медицинское  изделие фотодитазин гель  (Россия, рег. удост.  №ФС  012а  2006/4192-06). Активным веществом «Фотодитазина» является хлорин  Е6 в виде  комплекса с N-метил-D-глюкамином4. Однако, хлорин  е6  обладает повышенным сродством   к  нормальному сосудистому эндотелию, что ограничивает его  возможности и перспективы для лечения воспалительных заболеваний полости  рта.   Способ  получения  субстанции этого  препарата достаточно сложен, следствием чего  является дороговизна препарата.

Таким  образом, актуальным является поиск новых эффективных ФС, доступных  для широкого  применения в стоматологии. В этой связи большой интерес представляет разработка нового   препарата «РадаДент плюс»  (регистрационное удостоверение №ФСР 2010/08622, ООО  «РАДА-ФАРМА»).  В состав его  субстанции входят   три   различных  ФС   хлоринового ряда: хлорин  е6,  хлорин  р6  и пурпурин.  Отличительной  особенностью данного препарата является функциональность каждого из  трех  ФС,  входящих в состав субстанции.

Целью  данной работы было  изучение эффективности нового  изделия медицинского назначения «РадаДент плюс» как препарата-фотосенсибилизатора для  ФДТ воспалительных заболеваний  тканей пародонта. Для  оптимизации времени экспозиции геля  и выбора режимов ФДТ изучали кинетику  накопления нового  ФС в тканях  пародонта методом локальной флуоресцентной  спектроскопии (ЛФС).

МАТЕРИАЛЫ И  МЕТОДЫ

Препарат

В качестве фотосенсибилизатора был использован  гель   «РадаДент плюс»  (регистрационное  удостоверение   №   ФСР   2010/08622, ООО «РАДА-ФАРМА») (фото 1). Активным веществом «РадаДент плюс»  является субстанция  «Радахлорин», которая представляет собой смесь трех хлоринов, а именно: хлорина е6, хлорина  р6 и пурпурина.

Пациенты

В исследовании приняло участие 40 пациентов  в  возрасте от  20  до  40  лет,  страдающих воспалительными заболеваниями  тканей пародонта  без  выраженной соматической патологии. Все  пациенты были  разделены на  нозологические  группы.  В первую  группу входило 20 пациентов   с   катаральным   гингивитом, во   вторую группу – 20 пациентов с диагнозом “пародонтит легкой  степени тяжести”.  Всем  пациентам было проведен курс  ФДТ,  состоящий из  3 сеансов с интервалом 2 дня.
После  проведения профессиональной гигиены  полости рта  осуществляли аппликационное  нанесение геля  в  количестве 0,1мл   на  см2 воспаленного участка ткани и зубодесневой бороздки (пародонтального кармана). Ткани пародонта изолировали индивидуальными пластиковыми каппами. Экспозиция геля  рассчитывалась на  основании результатов спектрально-флуоресцентного исследования.  После   смывания  геля   водой проводили световое  воздействие. Дозиметрические параметры светового воздействия определяли, исходя  из характера и площади патологического участка.

Для оценки  динамики заболеваний тканей пародонта и эффективности лечебных мероприятий  использовали  обратимые индексы (гигиенический индекс OHI-S,  пародонтальный индекс   по  Russell, PMA  по  Parma,  индекс кровоточивости).

Изучение накопления ФС  в  тканях  пародонта  проводили на  группе  добровольцев. Изоляцию  осуществляли при помощи индивидуальных пластиковых капп,  изготовленных методом вакуумной формовки.

Аппаратура для ФДТ

Для  проведения фотодинамического воздействия использовали полупроводниковый лазерный  аппарат  "ЛАХТА-МИЛОН" (регистрационное удостоверение №ФС  02262003/2932-06 от 06.03.2006г.;
ООО «Милон-Лазер», Санкт- Петербург) с длиной  волны  генерации 662 ± 3нм. Максимальная выходная мощность лазера  составляла 1,4 Вт.

Для  доставки лазерного излучения к тканям пародонта использовались следующие оптоволоконные инструменты: насадка для облучения верхней и нижней  челюсти; насадка с цилиндрическим диффузором длиной  50 мм, диаметром 4 мм;  насадка с  полимерным рассеивателем  диаметром 10-12  мм  (ООО  «Полироник»,  Москва). Внешний  вид насадок представлен на фото 2.

Аппаратура для спектрально- флуоресцентных исследований

Для  измерений спектров флуоресценции слизистой оболочки полости рта применяли спектрально-флуоресцентную диагностическую установку «Спектр-Кластер» (регистрационное удостоверение   №29/05020401/3958-02;   ООО «Кластер»,  Москва). 

Измерения  проводили  in vivo с помощью волоконно-оптического зонда, специально разработанного для стоматологического применения.

Для  регистрации спектров и  анализа  получаемой спектральной информации в работе была  использована методика ЛФС, разработанная для исследований непигментированных мягких тканей при терапевтических концентрациях экзогенного флуоресцентного маркера.

В качестве источника возбуждения флуоресценции использовали излучение лазерного диода с длиной  волны  635 нм, что позволяло возбуждать экзогенную флуоресценцию хлоринов  без  возбуждения эндогенной флуоресценции тканей пародонта.

Для нормировки спектров флуоресценции  использовали  величину обратного диффузно-рассеянного в ткани сигнала возбуждающего лазерного излучения (ОДР).

Величину  нормированной флуоресценции Фн определяли как отношение интегральной интенсивности флуоресценции ткани  в спектральном диапазоне 650-750 нм к интегральной интенсивности  ОДР  сигнала в  спектральном диапазоне 628-638  нм. 

Такая  методика  позволяет  проводить  неинвазивные и воспроизводимые измерения  накопления ФС  в  биотканях и  широко используется при клинических испытаниях ФС нового  поколения.

Измерения   спектров  проводили  до   и через 5, 10, 15, 30, 45, 60 минут после нанесения геля  «РадаДент плюс».  В качестве контрольных точек   были   выбраны:  зубодесневой  сосочек (ЗС),  свободный край  десны (СКД),  переходная складка (ПС).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Прежде всего, необходимо отметить, что при  использовании геля  «РадаДент плюс»  случаев  местных и  общих   токсико-аллергических реакций отмечено не было.

Измерение  спектров флуоресценции  показало, что при всех временах экспозиции геля в тканях пародонта регистрируется экзогенная флуоресценция с  максимумом в  красной области  спектра на  670  нм,  которая соответствует флуоресценции ФС  хлоринового ряда (фото 3, 4). 

При времени экспозиции 5 минут наблюдался равномерный рост величины Фн во всех контрольных  точках.   При   экспозиции  10   минут   и более  распределение  экзогенной флуоресценции   становилось  неравномерным:  наиболее интенсивная флуоресценция  хлорина регистрировалась в  ЗС. 

При  экспозиции 15  минут  продолжался рост  величины экзогенной флуоресценции  ФС во всех  контрольных точках  (фото 4) (Фн  6). Дальнейшее увеличение времени экспозиции  геля  до 45 и 60 минут не приводило к росту величины Фн, что позволило сделать вывод о достижении фазы  «насыщения». На  основании полученных результатов  был   сделан  вывод  о том,  что оптимальный временной интервал экс- позиции геля  «РадаДент плюс»  в тканях  составляет  30-60  минут.
У всех  пациентов был получен  быстрый противовоспалительный эффект  ФДТ.   Наилучший результат лечения был достигнут  после трех сеансов  ФДТ. 

При  каждом сеансе  экспозиция геля  составляла 45 минут. При гингивите эффективная световая  доза  составляла  2,5   Дж/см2, время облучения в среднем достигало 6 минут на челюсть.

При пародонтите легкой  степени эффективная световая доза была  6 Дж/см2,  а время облучения в  среднем  достигало 12  минут.  При контрольном осмотре уже  после первого сеанса ФДТ наблюдалось уменьшение гиперемии, отечности и кровоточивости тканей десны.

Эффективность лечебных мероприятий с использованием геля «РадаДент плюс» подтверждается динамикой обратимых индексов: гигиенический индекс OHI-S, пародонтальный индекс по Russell, PMA по Parma, индекс кровоточивости (таблицы 1, 2).

Как  следует из  приведенных таблиц, при гингивите индекс PMA по Parma и гигиенический индекс снижается более чем  в 3 раза, при пародонтите легкой  степени наблюдается уменьшение пародонтального индекса по Rassell более чем в 3 раза,  снижение гигиенического индекса –  более чем  в  5  раз. При  обеих  патологиях после курса ФДТ отмечается отсутствие кровоточивости.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В  данной работе  разработана  методика ФДТ  хронического генерализованного  гингивита,  хронического генерализованного  пародонтита   легкой   степени  тяжести  с  использованием геля-фотосенсибилизатора  тканей к  световому излучению «РадаДент плюс».  Изучена кинетика накопления ФС в тканях  пародонта и оптимизирована временная экспозиция геля,  составляющая  30-60  минут.

У всех  пациентов (n=40)  после 3  сеансов ФДТ  с  гелем «РадаДент плюс»  был получен  быстрый противовоспалительный эффект. Как показали исследования, эффективная световая доза составляет 2,5 – 6 Дж/см2  в зависимости от тяжести патологического процесса.

Можно предположить, что высокая эффективность данного  препарата  обусловлена  его удачно подобранным сложным химическим составом. Один из его компонентов, хлорин е6, обладает  тропностью к воспалительной ткани,  другой  – хлорин р6 – имеет сродство к бактериальной стенке,  а третий  компонент – пурпурин – тропен  к митохондриям бактериальной клетки. Таким образом, новый  препарат может  действовать как на бактериальный, так и на сосудистый компоненты, т.е. на два  звена воспалительного процесса.

Разработанная методика и новый  препарат  для  ФДТ  являются безопасными, не  вызывают  токсико-аллергических реакций.

Дополнительным преимуществом является более низкая стоимость изделия медицинского назначения «РадаДент плюс» (по сравнению с фотосенсибилизаторами хлоринового ряда, применяемыми в стоматологической практике).

Предполагается проведение исследований эффективности данного изделия для профилактики заболеваний пародонта.

Источник: Журнал «Инновационная стоматология 1/2010»
Академия Инновационной Стоматологии «АИСт» - www.academia-aist.ru